多肽与寡核苷酸药物杂质风险特征及限度管控探析

发布时间：2026-07-09来源：药事纵横

摘要：多肽与寡核苷酸药物现已成为全球创新药研发的核心赛道，其产品相关杂质的质量控制是药品审评重点关注的核心技术难点。本文系统对比两类药物杂质的风险特征，深度剖析监管机构划定杂质限度标准的底层逻辑与核心考量维度，并围绕多肽及寡核苷酸产品相关杂质的限度制定依据、免疫原性风险评价及高风险杂质质量管控三大核心维度展开论述。不足和缺陷之处，望同行批评指正。

一、多肽及寡核苷酸产品相关杂质的限度制定依据

参照CDE发布的《化学合成寡核苷酸药物（创新药）药学研究技术指导原则（试行）》，《化学合成多肽药物药学研究技术指导原则（试行）》及ICHQ3A等指导原则，小分子化药、多肽及寡核苷酸产品相关杂质的报告限、鉴定限与界定限如下表所示：

表小分子化药、多肽及寡核苷酸产品相关杂质的报告限、鉴定限与界定限

1.1、小分子化药限度制定依据是什么

针对非遗传毒性产品相关杂质通用安全基准，小分子化学基础安全阈值为1mg/天，Kenyon等（2024）基于包含4878种化学品的NO(A)EL毒理数据库，通过异速生长标度法重新验证1mg/天终身阈值的毒理可靠性，并提出基于给药时长的分级可接受摄入量：给药周期小于1个月时杂质日暴露上限20mg，1～12个月给药上限5mg，长期终身给药维持1mg标准。ICHQ3A\B基于监督需求，基于每日最大剂量，制定了杂质控制的报告限度、鉴定限度和界定限度。

1.2、多肽、寡核苷酸限度制定依据是什么

多肽、寡核苷酸杂质与原料药结构同源接近人体内源性物质，整体毒性风险低于小分子杂质，根据礼来团队2025年AAPS Journal发表的文章，EMA及FDA目前制定的行业指导类文章是基于毒理学安全阈值计算体系，制定了多肽和寡核苷酸的报告限度、鉴定限度和界定限度。其核心基础是沿用了小分子毒理公认的1mg/天杂质安全阈值，基于短疗程修订公式、分子量差异调整及限度换算配套工具进行制定。

表多肽、寡核苷酸限度制定依据

二、多肽与寡核苷酸免疫原性风险评估

2.1、寡核酸免疫原性风险评估

寡核苷酸的序列存在依赖性固有免疫激活风险，依靠CpG、双链RNA等核酸特征序列作为PAMP，被TLR9、STING、炎症小体等模式识别受体识别，直接激活固有免疫，快速释放IFN、促炎因子，引发输注反应、局部炎症等，需在序列设计与工艺阶段进行风险控制。其产品相关杂质通常与主成品有类似结构，因此杂质引入固有免疫激活风险较低。

因寡核苷酸无蛋白/多肽结构，无法有效激活CD4+T细胞，难以产生长效IgG抗药抗体；仅少量2’-MOE修饰单链寡核苷酸偶发微弱ADA，无临床影响。

FDA推荐的免疫原性研究技术要求为体外免疫原性检测（IIRMI法）：采用人外周血单核细胞（PBMC）体系，通过检测IL6（白细胞介素6）、Mx1（干扰素诱导基因）mRNA表达水平评价药物固有免疫激活潜力；2‘-MOE（甲氧基乙基）修饰、PS骨架、5-甲基胞嘧啶等常用化学修饰会降低该方法检测灵敏度，需结合本品序列及修饰特征，单独完成方法学适用性验证。EMA、FDA及NMPA对寡核苷酸采用分类管理模式，如下表所示：

表寡核苷酸分类管理列表

2.2、多肽免疫原性风险评估

多肽杂质免疫原性为核心风险，多肽杂质经抗原呈递细胞处理后，通过HLA-II激活T细胞，诱导持续性抗药抗体，可能中和药物、攻击人体内源蛋白，存在严重临床风险；普通动物毒理无法有效预测人体免疫反应。以多肽疫苗临床数据为依据，单种高风险多肽杂质基准安全剂量0.05mg/剂。多肽类杂质安免疫风险评估，高风险杂质包括共价高分子聚集体、缺失/插入/截短/D消旋杂质等，可生成独立新表位，低风险杂质包括氧化还原、氨基酸侧链环化及化学修饰杂质，仅可能微调T细胞表位亲和力。

目前国内外相关指导原则无分类管理，个人认为可根据其免疫原性风险分为三类类进行管理。

表多肽类杂质分级管理

三、多肽高风险杂质管控

Dr. Reddy's、Eli Lilly、Pfizer、FDA共识要点

采用分阶段、基于风险的框架，结合AI/ML在研发早期预测并最小化杂质；
评估杂质风险须同时考虑给药剂量，而非孤立看杂质比例；
阈值表达建议从“占原料药百分比”改为“按质量（mass）表示”，更贴合真实免疫原性风险；
FDA展示了基于杂质对比的决策树：对仿制药中新检出、或显著高于RLD的杂质，启用正交IVISIA评估。

四、参考文献

[1]Kenyon M O, Martin M, Martin E A, et al. Deriving acceptable limits for non-mutagenic impurities in medicinal products–Durational adjustments[J]. Regulatory Toxicology and Pharmacology, 2024, 150: 105644.

[2]A Phase‑Appropriate Risk Assessment Strategy in Support of the Safety of Peptide and Oligonucleotide‑Related Impurities[J] The AAPS Journal (2025) 27:56,美国药学科学家协会杂志

[3] FDA仿制多肽与寡核苷酸药物的免疫原性风险评

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