PNAS：陆军军医大学邓有才等团队发现Rbp-Jκ-Klf2轴确立为NK细胞终末成熟与归巢主调控网络

自然杀伤（NK）细胞——1型先天淋巴样细胞（ILC1s）的一个亚群——在病毒清除和早期肿瘤免疫监视中发挥关键作用。它们通过释放细胞毒性分子直接消除靶细胞，并通过细胞因子分泌激活其他免疫细胞。

由于同种异体NK细胞过继转移在癌症治疗中的巨大成功，基于NK细胞的免疫治疗在癌症、传染病和自身免疫性疾病领域引起了广泛关注。因此，对NK细胞发育和效应功能机制的更深入理解可能导致鉴定新的靶点，以提高基于NK细胞的免疫治疗效率。

在小鼠中，NK细胞在骨髓（BM）中由共同淋巴样祖细胞发育而来，在CD122表达起始后经过三个连续阶段：Lin⁻CD122⁺NK1.1⁻DX5⁻ NK前体细胞（NKPs）、Lin⁻CD122⁺NK1.1⁺DX5⁻未成熟NK细胞（iNKs）和Lin⁻CD122⁺NK1.1⁺DX5⁺成熟NK细胞（mNKs）。

在NK1.1表面表达后，NK细胞成熟可根据CD27和CD11b的表面表达分为三个连续阶段：CD27⁺CD11b⁻（CD27SP）、CD27⁺CD11b⁺（DP）和CD27⁻/低CD11b⁺（CD11bSP）。分化后，一部分NK细胞离开BM进入循环，主动巡逻外周组织。NK细胞迁移至感染或恶性肿瘤部位，在此执行效应功能。然而，控制NK细胞发育、迁移和效应功能的转录机制尚未被完全理解。

图1.Rbp-Jκ缺乏会破坏组织内NK细胞的成熟程序（摘自

PNAS

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Notch信号通路是一条进化保守的调控级联，调节包括NK细胞在内的多种细胞类型的分化、增殖和命运决定。该通路包含Notch配体、Notch受体和细胞内转录因子CSL蛋白（在人类中称为Cbf-1或RPBJ，在小鼠中称为免疫球蛋白κ J区重组信号序列结合蛋白（Rbp-Jκ））。

在Notch胞内结构域（NICD）存在时，Rbp-Jκ充当转录共激活因子，而在NICD不存在时，Rbp-Jκ通过招募其他共抑制因子形成共抑制复合物。Rbp-Jκ在T细胞和B细胞发育和功能中的作用至关重要，但其在NK细胞中的功能仍存在争议。先前在Rbp-Jκfl/flVavCre/+小鼠（泛造血Rbp-Jκ缺失）和Rbp-Jκfl/flIL7rCre/+小鼠（表达CD127的I型ILCs中Rbp-Jκ缺失）中的研究揭示，Rbp-Jκ缺失损害了NK细胞的特化和成熟，并导致慢性激活。

相比之下，用Rbp-Jκ缺陷BM细胞（来自Rbp-Jκfl/flMxcre小鼠）和野生型（WT）BM细胞的1:1混合物重建致死照射的CD45.1 C57BL/6小鼠，显示两种基因型之间胸腺NK细胞和NK细胞亚群数量相当。这些差异促使作者生成Ncr1iCre × Rbp-Jκfl/fl小鼠，使得能够在NK细胞特化后特异性缺失Rbp-Jκ。该模型可用于鉴定Rbp-Jκ在NK细胞成熟、效应功能和迁移中的细胞内在作用。

在本研究中，作者将遗传消融（Ncr1iCre × Rbp-Jκfl/fl）研究与单细胞RNA测序（scRNA-seq）、scATAC-seq、bulk ATAC-seq、CUT&Tag和功能检测相结合，以阐明Rbp-Jκ在NK细胞中调控作用的潜在机制。

作者的结果表明，Rbp-Jκ协调NK细胞的染色质重塑，从而控制成熟、效应功能和迁移。机制上，Rbp-Jκ转录调控Krüppel样因子2（Klf2），而Klf2反过来介导Rbp-Jκ对NK细胞成熟和迁移的影响。

参考消息：https://doi.org/10.1073/pnas.2525481123